Untersuchungen zur Verbreitung von Infektionen mit Mykobakterium avium ssp. paratuberculosis in schweizerischen Rinderbeständen: Seroprävalenz und Nachweis des Erregers durch Anzüchtung und DNA-Amplifizierung

• Forschungsstelle: BLV
• Projektnummer: 1.00.11
• Projekttitel Englisch: Prevalence of Mycobacterium avium ssp. paratuberculosis in dairy cattle in Switzerland: seroprevalence and detection of the agent by direct culture and DNA-amplification

Schlüsselwörter (Deutsch)

Mycobacterium avium subspezies paratuberculosis, Milchkuh, Prävalenz, Serologie, Kultur, PCR-Amplifikation, RFLP-Analyse

Schlüsselwörter (Englisch)

Mycobacterium avium subspezies paratuberculosis, dairy cattle, prevalence, serodiagnosis, culture, PCR-amplification, RFLP-analysis

Kurzbeschreibung (Deutsch)

Zur Ermittlung der Prävalenz der Paratuberkulose in schweizerischen Rinderbeständen soll ein neu etablierter und in Deutschland in der Zulassung befindlicher ELISA zum Nachweis von Antikörpern gegen Mycobacterium (M.) avium subsp. paratuberculosis bei Rindern aus Beständen mit gemeldeter Paratuberkulose und aus Beständen ohne entsprechenden Vorbericht eingesetzt werden. Die serologischen Untersuchungen werden durch die Erregeranzüchtung aus Kot sowie aus Darmschleimhaut und Darmlymphknoten validiert. Neben der Erregeranzüchtung wird ein PCR-Protokoll zur Amplifizierung erregerspezifischer DNA neu etabliert. Der ELISA wird nach Validierung für eine Prävalenzstudie "Schweiz" an einer Serumbank eingesetzt, die durch Probenentnahme an Schlachthöfen in verschiedenen Kantonen aufgebaut wird. Anhand der serologischen Befunde werden Verfolgsuntersuchungen in seropositiven Beständen durchgeführt. Die Methoden des kulturellen Erregernachweises und der DNA-Amplifizierung werden in Verbindung mit dem ELISA zur Ermittlung des Herdenstatus eingesetzt. Isolate von M. avium subsp. paratuberculosis werden für den Aufbau einer Stammsammlung phänotypisch und genetisch klassifiziert und näher charakterisiert. Die erzielten Resultate der geplanten Studien sollen hinsichtlich der Notwendigkeit zur Sanierung infizierter Bestände ausgewertet werden.

Projektziele (Deutsch)

Durch die Studie sollen Daten zur Prävalenz der bovinen Paratuberkulose in der Schweiz erarbeitet werden. Parallel sollen Isolate von M. avium subsp. paratuberculosis gewonnen und einer weitergehenden molekularen Charakterisierung unterzogen werden. Die Isolate sollen in einer Stammsammlung asserviert werden und zukünftig für mikrobiologische und v.a. epidemiologische Untersuchungen zur weiteren Aufklärung des bislang vermuteten Zusammenhanges zwischen Paratuberkulose bei Wiederkäuern und der Enteritis regionalis Crohn des Menschen auch für andere Forschungsgruppen zur Verfügung stehen. Weiteres Ziel ist die Etablierung einer spezifischen und sensitiven serodiagnostischen Methode, die zukünftig im Rahmen von internationalen Ringversuchen validiert werden kann.

Abstract (Deutsch)

Kulturell war MAP im Kot von 15 Tieren (8,1%) der Gruppe A nachweisbar. 39 der 186 Kühe aus Beständen mit gemeldeter Paratuberkulose (20,9%) wiesen MAP-Antikörper auf. Serologisch positive Reaktionen wurden in 15,3% der Fälle durch den kulturellen Nachweis von MAP bestätigt. In der Seroprävalenzstudie an 526 Seren von Kühen reagierten im SVANOVIR-ELISA 54 Seren (10,3%) positiv und 56 Seren (10,6%) grenzwertig. Demgegenüber konnten nach Absorption der Seren mit M. phlei und anschliessender Untersuchung im Pourquier PTB-ELISA jeweils nur eine (0,2%) positive und eine grenzwertige Probe nachgewiesen werden, ein deutlicher Hinweis auf die geringe Spezifität des SVANOVIR-ELISA.

Publikationen / Ergebnisse (Deutsch)

Glanemann, B., Hoelzle, L.E., Wittenbrink, M.M. (2002) Bakteriologische Untersuchungen zur Paratuberkulose in Rinderbeständen in der Schweiz. DTW 109, 528-529.

Wittenbrink, M.M. (2002) Aktuelle Befunde zur Paratuberkulose des Rindes in der Schweiz. Tagung der Fachgruppe Bakteriologie, DVG; 22.-25.05.2002, Hannover, Germany.

Wittenbrink, M.M., Glanemann, B., Hoelzle, L.E. (2002) Aktuelle bakteriologische Untersuchungen zur Paratuberkulose in Rinderbeständen in der Schweiz. BVET-Workshop Paratuberkulose in der Schweiz, 19.04.02, Bern.

Publikationen / Ergebnisse (Englisch)

Glanemann, B., Hölzle, L.E., Wittenbrink, M.M. (2003) Bacteriological investigations about paratuberculosis in dairy herds in Switzerland. SGM, Annual Meeting; Swiss Medical Weekly, 133, Suppl. 134, 9.

Glanemann, B., Hoelzle, L.E., Bögli-Stuber, K., Jemmi, T., Wittenbrink, M.M. (2004) Detection of Mycobacterium avium subspecies paratuberculosis in Swiss Dairy Cattle by Culture and Serology. Schweiz. Arch. Tierheilk., Band 146, Heft 9, 409-415.

Glanemann, Barbara, Tierärztin aus Greven (Deutschland), (2004): Detection of Mycobacterium alvium subspecies paratuberculosis in Swiss dairy cattle by culture and serology. Dissertation, Veterinärmedizinische Fakultät, Universität Zürich, Schweiz.