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Forschungsstelle
BLV
Projektnummer
1.13.09
Projekttitel
Verwendung von Pseudotyp-Replikonpartikel für den Nachweis von neutralisierenden Antikörpern gegen hochpathogene Viren (Rabies, Aviäre Influenza)
Projekttitel Englisch
Use of pseudotype replicons particle for the detection of neutralizing antibodies to highly pathogenic viruses (rabies viruses, avian influenza viruses)

Texte zu diesem Projekt
 DeutschFranzösischItalienischEnglisch
Schlüsselwörter
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Kurzbeschreibung
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Projektziele
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Publikationen / Ergebnisse
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Erfasste Texte


KategorieText
Schlüsselwörter
(Deutsch)

Aviäre Influenzaviren, Neutralisationstest, Serologie, Pseudotypvirus, Zoonosis, Biosicherheit, Replikonpartikel, Luziferase
Schlüsselwörter
(Englisch)

Avian influenza virus, neutralisation test, serology, pseudotype virus, zoonosis, biosafety, replicon particle, luciferase
Kurzbeschreibung
(Deutsch)
Der Virusneutralisationstest ist ein Verfahren, um neutralisierende Antikörper gegen bestimmte Viren im Serum eines Patienten nachzuweisen und zu quantifizieren. Diese Methode ist spezifischer und empfindlicher als die meisten sonstigen serologischen Nachweisverfahren, ist jedoch aufwendig und langwierig in der Durchführung. Ein wesentlicher Nachteil ist ausserdem der Umgang mit infektiösen Viren, was bei einigen zoonotischen Erregern das Arbeiten unter BSL-3-Bedingungen zwingend notwendig macht. Das Ziel dieses Projektes ist es, Pseudotyp-Replikonpartikel auf Basis eines defekten Virus der vesikulären Stomatitis herzustellen. Die Partikel werden mit dem Hämagglutinin bestimmter Subtypen aviärer Influenzaviren komplementiert (in trans). Das Genom enthält dagegen keinerlei Informationen für ein Hüllprotein, kodiert aber eine Luziferase, mit deren Hilfe die Infektion frühzeitig und empfindlich nachgewiesen werden kann. Das System kann als sicher gelten, da die Infektion nur auf die primär infizierten Zellen beschränkt bleibt. Dieser sehr empfindliche und schnelle Test kann unter anderem für das epidemiologische Monitoring aviärer Influenzaviren eingesetzt werden. Zudem lässt sich das Verfahren auch auf andere virale Erreger mit zoonotischem Potential übertragen
Kurzbeschreibung
(Englisch)
Virus neutralization tests allow detection and quantification of virus-neutralizing antibodies in the serum of a patient. Although this method has a higher sensitivity than other serological tests, it is cumbersome and time intensive. Another drawback is that virus neutralization tests require handling of infectious virus, demanding BSL-3 containment in the case of certain zoonotic pathogens. The goal of the present project is the development of a neutralization test for lyssaviruses and influenza viruses based on pseudotype vesicular stomatitis virus replicon particles. The particles will be complemented in trans either with the glycoproteins of  lyssaviruses or with the hemagglutinin of certain influenza virus subtypes. The RNA replicon genome lacks any information for an envelope protein but will encode for a luciferase reporter enzyme to quantify infection in a rapid and sensitive way. The system is safe as infection with the defective pseudotype particles will be restricted to the primary infected cells. This rapid and sensitive test may be used for the serological monitoring of avian influenza viruses and epidemiological studies. In addition, the test may be adapted to other viruses with zoonotic potential.
Projektziele
(Englisch)

The goal of this project is the generation of a reliable and safe diagnostic test for the detection of neutralizing antibodies directed against RABV and avian influenza viruses (H5, H7, H9). The test will be based on a versatile vesicular stomatitis virus (VSV) pseudotype system, which is:

  • Safe (suitable for standard diagnostic laboratories)  
  • Fast (results within 6 h)
  • Sensitive (even very low amounts of VN antibodies can be detected)
  • Quantifiable (by taking advantage of an reporter system)
  • Reliable (reproducible results)

This test may be further adapted to the diagnosis of other enveloped, highly pathogenic or non-cultivable viruses. This approach will be in particular valuable for the rapid diagnosis of emerging and re-emerging viruses with zoonotic potential.
Publikationen / Ergebnisse
(Englisch)

Zimmer, G.; Locher, S.; Berger Rentsch, M.; Halbherr, S.J. (2014) Pseudotyping of vesicular stomatitis virus with the envelope glycoproteins of highly pathogenic avian influenza viruses. J. Gen. Virol. 95, 1634-1639.

Halbherr, S. J.; Ludersdorfer, T. H.; Ricklin, M.; Locher, S.; Berger Rentsch, M.; Summerfield, A.; Zimmer, G. (2014) Biological and protective properties of immune sera directed to influenza virus neuraminidase. J. Virol. 89:1550-1563.

Moreira, E.A.; Bolte, H.; Locher, S.; Juozapaitis, M.; Aydilllo, T.; García-Sastre, A.; Schwemmle, M.; Zimmer, G. (2016) Infectious bat-derived influenza A virus (H18N11) reveals a cell type-specific but not species-specific tropism. Proc. Nat. Acad. Sci. U.S.A.

Moeschler, S.; Locher, S.; Conzelmann, K.-K.; Krämer, B.; Zimmer, G. (2016) Quantification of lyssavirus neutralizing antibodies using vesicular stomatitis virus pseudotype particles. Viruses 8:254
Zugehörige Dokumente
URL-Adressen
(Deutsch)