Entwicklung eines Multipex-ELISA zur gleichzeitigen Detektion und Differenzierung von Antikörpern gegen das europäische und amerikanische PRRS-Virus unter Verwendung von rekombinant hergestellten Virusantigenen

• Forschungsstelle: BLV
• Projektnummer: 1.99.05
• Projekttitel Englisch: Development of a recombinant antigen-based mulitplex ELISA for the simultaneous detection and differentiation of antibodies against the European and American strains of PRRS virus

Schlüsselwörter (Deutsch)

Arterivirus, PRRS, ELISA, rekombinantes Antigen, Nukleokapsid, Antikörpernachweis, Differenzierung

Schlüsselwörter (Englisch)

arterivirus, PRRS, ELISA, recombinant antigen, nucleocapsid, antibody detection, differentiation

Kurzbeschreibung (Deutsch)

Es soll ein neuartiger ELISA für den Nachweis von Antikörpern gegen europäische und amerikanische Stämme des PRRS-Virus entwickelt werden, welcher beide Arten Antikörper zuverlässig erkennt und im gleichen Testansatz eine Differenzierung erlaubt. Durch Expression der Nukleokapsidprotein-Antigene als Fusionsproteine im Baculovirussystem wird eine weitere Verbesserung der Spezifität und Sensitivität des kürzlich in unserem Labor entwickelten ELISAs (Denac et al., J. Virol. Meth. 65, 169-181, 1997) erwartet.

Kurzbeschreibung (Englisch)

A novel type of ELISA for the detection of antibodies against PRRS virus will be developed, allowing the reliable detection of antibodies against both European as well as American virus strains, and simultaneously the differentiation of the two antibody types in the same assay. By expressing the nucleocapsid antigens as fusion proteins the specificity and sensitivity of a recently developed PRRS ELISA (Denac et al., J. Virol. Meth. 65, 169-181, 1997) are likely to be further enhanced.

Projektziele (Deutsch)

Es soll ein neuartiger ELISA für den Nachweis von Antikörpern gegen europäische und amerikanische Stämme des PRRS-Virus entwickelt werden, welcher beide Arten Antikörper zuverlässig erkennt und im gleichen Testansatz eine Differenzierung erlaubt.

Abstract (Deutsch)

Ergebnisse und Bedeutung

Durch Optimierung verschiedener Parameter gelang es, einen Differenzierungs-ELISA zu entwickeln, der sowohl eine im Vergleich zum vorherigen KSP-ELISA verbesserte Sensitivität aufweist als auch KSPV-Antikörper zuverlässig von BVDV- und BDV-Antikörpern zu unterscheiden vermag. Sobald genügend Validierungsdaten vorliegen, wird dieser ELISA - vorerst als Ergänzung, später falls möglich als Ersatz des arbeits- und zeitaufwändigen Serumneutralisationstests - in unserer Routinediagnostik zum Einsatz kommen. Überdies hat dieser Test das Potential, mittels Technologietransfer an einen Diagnostika-Hersteller kommerziell vermarktet zu werden.

Publikationen / Ergebnisse (Englisch)

Seuberlich, Torsten, (2002): Nucleocapsid protein-based ELISA for detection and differentiation of antibodies against European and North American porcine reproductive and respiratory syndrome virus. Inaugural Dissertation, Veterinär-Medizinische Fakultät, Universität Bern, Switzerland.

Seuberlich, T., Tratschin, J-D., Thür, B., Hofmann, M. A., (2002): Nucleocapsid protein-based Enzyme-Linked Immunosorbent Assay for Detection and Differentiation of Antibodies against European and North American Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus.Clinical and Diagnostic Laboratory Immunology, Vol. 9, No. 6.

Seuberlich, Torsten, (2002): Nucleocapsid protein-based ELISA for detection and differentiation of antibodies against European and North American porcine reproductive and respiratory syndrome virus. Inaugural Dissertation, Veterinär-Medizinische Fakultät, Universität Bern, Switzerland.

Seuberlich, T., Tratschin, J-D., Thür, B., Hofmann, M. A., (2002): Nucleocapsid protein-based Enzyme-Linked Immunosorbent Assay for Detection and Differentiation of Antibodies against European and North American Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus.Clinical and Diagnostic Laboratory Immunology, Vol. 9, No. 6.