Evaluation and application of detection methods for anti-virus antibodies in trout blood

• Forschungsstelle: BLV
• Projektnummer: 1.05.07
• Projekttitel Englisch: Evaluation and application of detection methods for anti-virus antibodies in trout blood

Schlüsselwörter (Deutsch)

VHS, IHN, Antikörper, Nachweismethode, ELISA, Serumplaqueneutralisationstest

Kurzbeschreibung (Deutsch)

Virale Hämorrhagische Septikämie (VHS) und Infektiöse Hämatopoietische Nekrose (IHN) sind meldepflichtige Fischseuchen sowohl in der Schweiz als auch in der EU. Zwei Ueberwachungskampagnen (1984/1985 und 2000/2001) ergaben nur wenige Stellen mit Virus-positiven Fischen in der Schweiz. Im Gegensatz dazu konnten an viel mehr Stellen, in Zuchten und Gewässern, Fische mit Anti-VHSV-Antikörpern gefunden werden. Diese widersprüchlichen Resultate werfen Fragen bezüglich der Eignung der Nachweismethoden resp. des tatsächlichen Seuchenstatus auf. Die Methoden für den Virusnachweis sind international anerkannt und mehrfach in internationalen Ringtests geprüft, was für den Antikörpernachweis nicht zutrifft. Das vorliegende Projekt wird die Spezifität und Sensitivität der serologischen Methoden prüfen. Zunächst werden ELISA und Serumneutralisationstest für den Nachweis von anti-VHSV und anti-IHNV-Antikörper etabliert. Dann werden von künstlich infizierten Fischen Proben in regelmässigen Abständen sowohl für den Virus- als auch den Antikörpernachweis genommen, um die beiden Nachweisverfahren gegeneinander zu vergleichen. Schliesslich werden Feldproben erhoben, um den Immunstatus freilebender Salmoniden gegen VHS und IHN zu ermitteln. Mit diesem Projekt wird a) ein validiertes Nachweisset für Antivirus-Antikörper bereitgestellt und b) die Kenntnis zum Status meldepflichtiger viraler Fischseuchen in der Schweiz verbessert.

Kurzbeschreibung (Englisch)

Viral haemorrhagic septicaemia (VHS) and infectious haematopoietic necrosis (IHN) are notifiable diseases of fish in both Switzerland and the European Union (EU), respectively. Two surveys on these diseases in Switzerland in 1984 /1985 and 2000/2001 revealed a low presence of virus-positive fish. In contrast, antibodies against VHSV could be demonstrated in a much higher percentage of fish, independent whether they originated from rivers or farms. These controversial results rise questions about accuracy and sensitivity of the diagnostic methods and on the actual status of fish viral diseases in Switzerland. While the methods for the detection of viruses are validated and tested regularly by international proficiency tests, those for the detection of anti-virus antibodies are not. The present project aims at evaluating the specificity and sensitivity of the serological methods versus the virus detection methods. To this end, ELISA and serum neutralisation plaque test for the detection of VHSV- and IHNV-antibodies will be established. From artificially infected fish, samples will be taken during the course of the infection, and the results of the virological and serological detection methods will be compared for sensitivity and specificity. In addition, samples will be taken also in the field to assess the immune status to VHS and IHN of feral fish in Switzerland. The results from this project will provide a) a validated set of methods for diagnosis anti-viral antibodies and b) improved knowledge on the prevalence of notifiable viral fish diseases in Switzerland.

Projektziele (Deutsch)

Ziel des vorgeschlagenen Projektes ist es, die Zuverlässigkeit und Aussagekraft serologischer Nachweisme-thoden für virale Fischseuchen im Vergleich zum Goldstandard (Virusisolation) und zur sensitiven RT-PCR festzustellen. Die verschiedenen Methoden sollen bezüglich Spezifität und Sensitivität untereinander verglichen und in ausgesuchten Fischzuchten / Gewässern angewendet werden. Eine Umfrage bei anderen Referenzlabors zu Serologiemethoden soll zudem einen Überblick über die in der EU angewandten Methoden sowie der damit gewonnenen Erkenntnisse und Erfahrungen bringen. Die Erkenntnisse aus dem Gesamtprojekt sind wesentlich im Hinblick auf die zukünftige veterinärmedizinische Überwachung viraler Fischseuchen.

Umsetzung und Anwendungen (Deutsch)

UMS 2009:

Umsetzung: wie weit wird die Methode in der Routineuntersuchung

eingesetzt und für epidemiologische Abklärungen?

Status: KOmmt an UMS 2010 (mvo)

Publikationen / Ergebnisse (Deutsch)

Klenk, M. (2008) Serologische Studien von verschiedenen VHSV-Infektionsmodellen in Regenbogenforellen. Dissertation, Vetsuisse Fakultät, Universität Bern.

Zugehörige Dokumente

• Datenblatt 1.05.07 [PDF] 10 kB

Publikationen / Ergebnisse (Englisch)

Zugehörige Dokumente

• Datenblatt 1.05.07 [PDF] 10 kB