Schlüsselwörter
(Deutsch)
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Aviditäts-ELISA, Toxoplasma gondii, Neospora caninum
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Schlüsselwörter
(Englisch)
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avidity-ELISA, Toxoplasma gondii, Neospora caninum
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Kurzbeschreibung
(Deutsch)
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Die beiden Protozoen Toxoplasma gondii und Neospora caninum sind phänotypisch und phylogenetisch nahe verwandte zystenbildende Kokzidien, welche Aborte und neuromuskuläre Erkrankungen bei verschiedenen Tierarten auslösen können. Die durch T. gondii verursachte Toxoplasmose - eine meldepflichtige Tierseuche - stellt zudem eine Zoonose dar, da sie beim Menschen insbesondere im Rahmen konnataler Infektionen und Infektionsgeschehen bei immungeschwächten Personen von Bedeutung sein kann.
Zur Diagnose einer Erkrankung am lebenden Tier mit kausaler Beteiligung der beiden erwähnten Parasiten werden heutzutage primär serologische Methoden eingesetzt. Die Verwendung "konventioneller" Verfahren wie ELISA und IFAT erlaubt jedoch keine Unterscheidung zwischen einer frischen (Erst)-Infektion und einer älteren, chronischen und meist subklinischen Verlaufsform. Gerade diese Unterscheidung ist aber aus diagnostischer und epidemiologischer Sicht bedeutsam, da einerseits bei T. gondii praktisch nur akute Erstinfektionen klinische Relevanz zeigen, währenddem andererseits bei N. caninum zusätzlich auch symptomlose, chronisch-presistierende Infektionen zu einem späteren Zeitpunkt klinische Manifestationen hervorrufen können.
Wir planen nun die Etablierung eines sogenannten Aviditäts-ELISA, der eine Unterscheidung zwischen "frischen" und "älteren" Infektionen ermöglichen soll. Das Testsystem - das sich in der Humanmedizin bereits bewährt hat - erlaubt aufgrund der während eines Infektionsverlaufes reifenden Antikörperavidität eine zeitliche Einordnung des Infektionsablaufes und unterstützt so die infektiologische und epidemiologische Beurteilung dieses Infektionsgeschehens.
Mit der Etablierung des Aviditäts-ELISA wollen wir deshalb ein Werkzeug zur Verfügung stellen, das sowohl in der Falldiagnostik als auch in epidemiologischen Untersuchungen zur Toxoplasmose und Neosporose eingesetzt werden kann, und das zur Gewinnung neuer Erkenntnisse für die Bekämpfung dieser beiden Krankheiten dienen soll.
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Kurzbeschreibung
(Englisch)
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Toxoplasma gondii and Neospora caninum are phenotypically and phylogenetically closely related cyst-forming coccidia, both of which may cause abortion and neuromuscular diseases in livestock animals. Toxoplasmosis is a notifiable animal disease, but T. gondii exhibits also zoonotic potential by causing diaplacental infections in the human fetus and harmful infections in immunosuppressed individuals.
Infection with both of these parasites is diagnosed in vivo mainly by serological methods. But the use of conventional techniques like ELISA or IFAT does not allow the differentiation between a new (first-) and an elder infection with chronic, mostly subclinical course. As only first-infections with T. gondii are of clinical relevance and as N. caninum is capable to produce asymptomatic, chronic-persisting infections with later clinical manifestation, a chronological differentiation would be of diagnostic and epidemiological significance.
We are planning to establish a so called avidity-ELISA that allows the distinction between "new" and "elder" infections. This test system is already in use in human medicine and bases on the increasing avidity of anti-bodies during the course of infection.
By establishing the avidity-ELISA we want to create a tool, that can be used for case diagnostics as well as for epidemiological studies on Toxoplasmosis and Neosporosis and that helps to improve the perceptions for fighting these diseases.
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Projektziele
(Deutsch)
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Ziel des vorliegenden Projektes ist die Etablierung und Validierung eines Aviditäts-ELISA zur Erfassung einer Toxoplasmose oder einer Neosporose, sowie zur serologischen Unterscheidung zwischen einer frischen (akuten) Infektion mit niedrig-avidem IgG und einer älteren/alten Infektion mit hoch-avidem IgG. Die zu lösende Problemstellung bezieht sich dabei nicht nur auf klinische Fälle beim Rind, Schaf und Hund, sondern auch - v.a. bezüglich der Neosporose- zur epidemiologische Erfassung der Infektionslage bei Betrieben, Herden und grösseren Tierpopulationen. So kann mit dem Aviditätstest ein wichtiger Beitrag zur Lösung der Problemstellung eines vertikalen ("Generationentransfer") versus horizontalen (Hund als Infektionsquelle?) Transmissionsmodus geleistet werden.
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Abstract
(Deutsch)
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Die Validierung des N. caninum Aviditäts-ELISA mit den Seren experimentell infizierter Kälber zeigte eine lineare Zunahme der Avidität in Abhängigkeit von der Zeit. Es konnte gezeigt werden, dass bei den Aborttieren eine Tendenz zur Abnahme der Avidität um den Abortzeitpunkt besteht, während die Werte Wochen bis Monate vor und nach dem Abort höher lagen. Da bei den natürlich infizierten Tieren Fluktuationen der Aviditäten festgestellt werden konnten, lässt sich mit dem N. caninum Aviditäts-ELISA nur bedingt eine Aussage über den Infektionszeitpunkt, und somit über die epidemiologische Bedeutung von postnatalen Infektionen machen. Er kann jedoch eine Risikoeinschätzung der Abortproblematik ermöglichen. Der T. gondii Aviditäts-ELISA erbrachte analoge Resultate bei der Validierung mit Seren von experimentell infizierten Schafen. Eine Untersuchung von natürlich infizierten Tieren mit und ohne Abort-Anamnese ergab mit 2-9% einen geringen Anteil niederavider Seren. Aufgrund der Validierung und der gesammelten Erfahrungen mit natürlich infizierten Tieren kann dieser Test zur Abklärung von akuter Toxoplasmose als geeignet angesehen werden. Das ELISA-System wurde für beide genannten Parasiten auch beim Hund geprüft. Erste Validierungen ergaben tiefe Werte bezüglich Sensitivität und Spezifität für T. gondii, so dass der Aviditäts-ELISA nur für N. caninum durchgeführt wurde. Dabei wurden bei Hunden mit Neosporose als klinische Verdachtsdiagnose mehrheitlich hohe Aviditäten festgestellt.
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Publikationen / Ergebnisse
(Deutsch)
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Gloor, Marianne, (2001): Etablierung und Validierung eines Aviditäts-ELISA zur Unterscheidung zwischen akuten und chronischen Infektionen mit Toxoplasma gondii und Neospora caninum beim Wiederkäuer und anderen Zwischenwirten, Inaugural-Dissertation, Institut für Parasitologie, Universität Bern, Switzerland.
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